<span class='title_c'>常见的冻干保护剂有哪些分类
那么由液体试剂变成干粉目前比较常用的方法就是低温真空干燥,去除水分达到干粉的形态,那么这个低温的环境下蛋白的结构就很容易改变,可能会影响蛋白的功能,所以冻干是要加保护剂的,不同种类保护剂的功能会不太一样.欣谕冻干总结一下常用的冻干保护剂都有哪些?主要分为五大类:一、PH缓冲剂,蛋白稳定性受ph的影响较大,在选择缓冲液大ph时候,尽量不要接近蛋白质的等电点,以避免蛋白的聚集,tris、组氨酸、柠檬酸盐在冷冻干燥过程中会显示较小的ph变化,一般选择的buffr溶液的ph为5.8-8.0即可。二、填充剂,为了保证冻干品形成良好的结构防止产品坍塌,同时也为了增加配方的溶解性,所以填充剂必须是充分可溶并且是与蛋白是相容的,常用的填充剂是甘露醇、甘氨酸,牛血清白蛋白等。三、糖类,糖类是蛋白冻干过程中的赋形剂,因为糖类物质中含有较多的羟基,可以取代蛋白质与水之间的氢键来提供稳定作用,一般是双糖,如蔗糖和海藻糖。四、非离子表面活性剂,可以减少蛋白质的聚集,最常用的是吐温80。五、配体,有时候还会加一些配体来提高蛋白质的热力学稳定性。
首先,我们要知道为什么现在越来越多的公司趋向于将各种蛋白冻干,是因为干粉状态下蛋白的稳定性较高,且要比液体试剂容易运输与储存,因此蛋白冻干已成为一个大的趋势。
壳聚糖冻干需要保护剂吗
冻干一般都是需要保护剂的,甘油、蔗糖、乳糖、山梨醇、壳聚糖这类都是要的。
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冻干工艺不加海藻糖有什么影响
单糖(如葡萄糖、半乳糖等)对蛋白质的冻干过程不能起到保护作用,这是因为单糖在冻结过程中只能提供微弱的稳定作用,使得蛋白质在脱水干燥前就发生了不可逆变性。
还原性二糖(蔗糖、海藻糖)作为保护剂,这是因为二糖既能在冷冻过程中充当低温保护剂,又能在干燥脱水过程中起到脱水保护剂的作用,并且不含还原基不会使得生物制品发生蛋白质褐变反应从而变质失活。所以在生物药品的冷冻干燥配方中,蔗糖和海藻糖是最常用的两种保护剂。
而与蔗糖相比,海藻糖具有更高的的玻璃化相变温度(120℃),因此海藻糖溶液更不容易形成冰晶。且海藻糖还具有神奇的水合能力:按每个葡萄糖单位算,海藻糖周围的不冻水分子数是糖类最多,海藻糖溶液能够形成刚性更强的海藻糖/水结构,抗冷冻脱水能力更强。这也是为什么在很多冻干试验中,海藻糖的表现会比蔗糖好。
此外,海藻糖还是很好的脂质体冻干保护剂。有研究表明,以海藻糖作保护剂的冻干脂质体粒径变化最小,保护效果最好;葡萄糖的粒径变化最大,保护效果最差。对于海藻糖,10%的浓度对冻干脂质体的保护效果最好。
海藻糖冻干保护剂的用量5%是占体积还是质量
质量。海藻糖和甘油作为冻干保护剂,海藻糖和甘油所占比例分别为5%和3%(质量比),并通过壳冷冻法,大大减少冻干时间。海藻糖冻干保护剂,是一种非还原性双糖,是替代蔗糖的冻干保护剂,非常适合蛋白质和生物大分子的冻干。
冻干保护剂的组成作用不包括哪一项
冻干保护剂的组成作用不包括糖类和蛋白类。
1、糖类:如蔗糖、甘露醇、山梨醇等,具有保护细胞膜、降低水活性、防止冰晶生成等作用。
2、蛋白类:如明胶、丝素、蛋白胨等,可以提供保护作用、支持母体蛋白质的复性和稳定性。